Fluolab【JACS】6.4倍荧光增益！CB7–P-ARose超分子复合点亮超分辨成像
一、研究背景
传统超分辨荧光显微镜需要可控“关–开”式探针，以降低背景并实现多重标记。然而市售染料大多“常亮”或调控幅度有限，难以满足亚细胞水平的背景抑制与通道复用需求。
二、分子设计亮点
- 主体：葫芦[7]脲（CB7）
- 水溶性高（5–30 mM），结合亲和力10^4–10^15 M^−1
- 极性入口与疏水腔体适合正离子配体嵌入
- 客体：新型罗沙明染料P-ARose
- 在游离态下通过“中间芳基”构筑自我猝灭结构
- 引入季铵键位于meso-苯环，实现与CB7强结合
三、超分子复合化机理
- P-ARose孤立时，4′-N,N-二甲基氨基诱发双色体效应，荧光被有效猝灭。
- 与CB7结合后，主体腔体包覆芳基，阻断猝灭途径并抑制扭曲电荷转移（TICT），实现荧光“关–开”切换。
- 复合态稳定性高，解离常数低至10^−15 M，保证活体应用中的持续开灯效应。
四、光学性能显著提升
- 荧光强度：结合后亮度提升6.4倍；
- 量子产率：从游离态的微弱发光提升4.2倍；
- 光稳定性显著增强，适合高功率STED照射。
五、细胞与超分辨成像应用
- 功能化：P-ARose可通过HaloTag配体或NHS酯偶联至蛋白质/抗体；
- 原位标记：未结合时背景信号极低，加入CB7后瞬时点亮；
- STED成像：在同一检测通道内实现多靶点伪双色顺序采集，分辨率突破衍射极限。
六、前景展望
- 额外新通道：非共价调控为超分辨多重成像提供全新切换策略；
- 可扩展：更换客体或主体有望实现可见–近红外全谱段荧光调控；
- 生物医学：未来可用于活体成像、疾病早筛及超分辨活细胞动态监测。