【JACS】 **eSylites：专门用于可视化兴奋性突触的后突触密度荧光探针

简介

这项研究介绍了eSylites，一种新型的荧光二价肽，专门用于可视化兴奋性突触的后突触密度（PSD）。研究重点在于提高可视化精度，克服现有抗体和荧光标签的局限。

摘要

通过设计高亲和力合成探针eSylites，该研究展示了其在单细胞和脑切片实验中标记PSD-95的能力。eSylites通过优化结构和染料相互作用，实现对突触组织的超高分辨率定位。测试发现，eSylites能够鉴别PSD-95纳米域，深入解析其在兴奋性神经传递中的功能。

研究结果与讨论

荧光探针设计

设计基于PSD-95结合肽，通过多价结合策略增强亲和力。荧光染料设计影响结合能力，研究显示非磺化染料展现更高亲和力。

探针在细胞和组织中的表现

探针在HEK293细胞和小鼠海马神经元中展现高特异性。1-4种探针被测试，其中第4号探针在抗背景噪声和信号增强方面表现最佳。

PSD-95家族的特异性

探针（例如eSylite-4）对PSD-95展现高选择性，并能区分SAP97和SAP102等类似蛋白。

在实时成像中的应用

在荧光寿命成像技术中，eSylites绑定PSD-95后寿命和各向异性显著增加，说明其适合多种高分辨率成像需求。

结论

eSylites是目前研究中首个能有效检测和映射PSD-95亚细胞分布的高精度探针。这项工作不仅扩展了荧光标记工具箱，还为兴奋性突触的功能研究提供了重要工具。

参考文献

Huhn, C.; Ho, S.-Y.; Schulte, C.; Khayenko, V.; Hemmen, K.; Peulen, T.-O.; Wiessler, A.-L.; Bothe, S.; Bej, A.; Talucci, I.; Schönemann, L.; Werner, C.; Schindelin, H.; Strømgaard, K.; Villmann, C.; Heinze, K. G.; Hruska, M.; Hell, J. W.; Maric, H. M. eSylites: Synthetic Probes for Visualization and Topographic Mapping of Single Excitatory Synapses. J. Am. Chem. Soc. 2025, jacs.5c00772. https://doi.org/10.1021/jacs.5c00772.